网络剧《兄弟，别闹！》的主人公是生活于中国各地的五对年龄、身份各不相同的兄弟。他们有吉林农村的中学生，有混迹香港的古惑仔，有奔波劳碌的IT程序员，也有永远失手的小偷，还有理发店的老板娘和大工。这五对兄弟虽然性格各异，但都对彼此充满着忠诚，互相依靠互相扶持。在面对各种困境时，五对兄弟总是抱着美好的愿望打算共渡难关，但是局限于每个人的智商和情商，总是弄巧成拙，演绎出一幕幕爆笑的剧情。
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